Техника оттаивания спермы

Размораживание спермы производится следующим образом:

1. Поставить на стол перед источником света микроскоп, протереть зеркало. (Увеличение должно быть в 200 раз).

2. Навести освещение (освещение должно быть равномерное по всему полю зрения.

3. Навести освещение, подключить электрический столик или заправить столик «Морозова» водой с температурой 40 – 42 С и установить его на предметный столик так, чтобы поле зрения было равномерно освещено.

4. Взять предметное и покровное стекла, протереть стерильной марлевой салфеткой и положить на столик «Морозова».

5. Приготовить водяную баню с температурой 40 – 42 С (для определения температуры воды обязательно воспользоваться термометром; затем отмерить цитрат , вылить его в стерильный флакончик , закрыть резиновой пробкой и поместить в паровую баню.

6. Надеть защитные очки и перчатки.

7. Снять крышку с сосуда Дьюара и положить ее на табурет , вынуть пробку и положить ее на крышку , обработанным пинцетом достать мешочек со спермой (не выше горловины сосуда), извлечь пинцетом гранулу из мешочка и положить ее во флакон с подогретым концентратом , мешочек опустить в азот , закрыть сосуд Дьюара, снять очки и перчатки , взять флакончик с гранулой , вращательными движениями перемешать содержимое флакона (оттаивать гранулу в течении 5 – 8 сек.

8. Взять подогретое предметное стекло, нанести стеклянной палочкой каплю спермы , сверху положить покровное стекло и определить активность спермиев.

9. При помощи макро-винта опустить тубус до прикосновения объектива с покровным стеклом.

10. Посмотреть в окуляр, медленно подняв тубус вращением макровинта до появлениев спермиев в поле зрения, а при помощи микро-винта навести резкость. Сперма к использованию допускается с оценкой не ниже 3 баллов (т.е. не менее 30% спермиев должны иметь прямолинейное поступательное движение.

При наличии спермиев только с колебательными движениями сперму оценивают буквой К.

При наличии только манежного движения – буквой М.

Неподвижность всех спермиев обозначают – буквой Н (некроспермия).

В свежеполученной хорошей сперме быка 80 – 90 % спермиев двигается поступательно.

Одновременно с оценкой под микроскопом подвижности спермиев глазомерно определяют густоту спермы – степень насыщенности ее спермиями. При этом сперма может быть:

1. Густая – все поле зрения заполнено спермиями , обозначают буквой Г.

2. Средняя – между спермиями промежутки примерно равны длине спермиев , обозначают буквой С.

3. Редкая – между спермиями в поле зрения большие промежутки, обозн. буквой Р.